超微量分(fēn)光光度計是核酸和蛋白定量的常用(yòng)工(gōng)具(jù)，在日常使用(yòng)過程中(zhōng)，空白測量是在樣品測量前所必須的步驟。正确的理(lǐ)解什麽是NanoPhotometer®或任何其他(tā)超微量分(fēn)光光度計上的空白測量，以及空白讀數對工(gōng)作(zuò)流程和結果産(chǎn)生的影響，是保障儀器正确操作(zuò)和獲得可(kě)靠結果的基礎。

對于雙光束紫外-可(kě)見分(fēn)光光度計而言，空白與樣品測量在空間上分(fēn)開，扣除空白後得到樣品的吸光值。而超微量分(fēn)光光度計通常采用(yòng)單光束設計，空白與樣品測量需要在時間上分(fēn)開，在進行空白測量後，得到表征光源強度的基線(xiàn)，然後樣品的測量值扣除空白測量值得到樣品的吸光值。在實際測量過程中(zhōng)，在一次空白測量之後，隻要樣品的溶劑成分(fēn)不變，可(kě)以連續地測量多(duō)個樣品，結果的計算都基于初始空白值的扣除。然而，空白基線(xiàn)的穩定是否受時間影響呢(ne)？即多(duō)久做一次空白，可(kě)以确定樣品的吸光值和濃度準确可(kě)靠呢(ne)？

由于超微量分(fēn)光光度計通常使用(yòng)氙閃燈光源，作(zuò)為(wèi)一種閃爍點亮的冷光源，其穩定性是非常好的，基線(xiàn)的穩定性通常在1小(xiǎo)時内可(kě)保持在0.002-0.003A（10mm光程）之内的波動水平，如果将光程因子計算在内，相當于1-2ng/μl dsDNA的濃度水平。對于常規濃度的樣品而言，這個誤差的引入幾乎可(kě)以忽略，也不會反映在重複性之上。因此，對于一般性實驗，在起碼一小(xiǎo)時内，空白測量是不用(yòng)重新(xīn)進行的（在樣品台清潔的情況下）。而對于低濃度樣品和一些流程嚴格控制的實驗而言，基線(xiàn)随時間的波動将引入值得關注的測量不确定度，可(kě)能(néng)産(chǎn)生可(kě)觀的示值誤差，但對重複性的影響較小(xiǎo)。因此，對于一些特殊樣品，空白測量與樣品測量不宜間隔較長(cháng)的時間，以減小(xiǎo)風險，甚至可(kě)能(néng)每個樣品都重新(xīn)做空白。

NanoPhotometer®在每次開機時都會對光源強度進行檢測，初始化通過即代表光源已進入工(gōng)作(zuò)狀态。在使用(yòng)過程中(zhōng)，也可(kě)以通過光譜診斷功能(néng)，實時地進行光源性能(néng)檢查。空白測量和基線(xiàn)穩定性對于超微量而言是重要的，不少日常使用(yòng)中(zhōng)出現的問題都源自于空白和基線(xiàn)漂移。除了設備自身的診斷功能(néng)之外，定期的進行設備的基線(xiàn)穩定性檢查也有(yǒu)助于判斷和基線(xiàn)有(yǒu)關的部件是否正常，如光源、光學(xué)路徑和檢測器。

Implen通過樣品壓縮法實現了測量時間的大幅縮短，使光源的壽命延長(cháng)至10年以上，在這個基礎上，進一步增強了光線(xiàn)的強度控制和穩定性。而出色的光學(xué)路徑設計和高性能(néng)通光材料的使用(yòng)，也确定了基線(xiàn)波動在很(hěn)小(xiǎo)的範圍内。在實際使用(yòng)過程中(zhōng)，用(yòng)戶根據樣品的實際情況和實驗允差要求，制定合理(lǐ)的空白測量頻率，可(kě)在确定可(kě)靠性的同時提高實驗效率。