微量分(fēn)光光度計主要用(yòng)于核酸及蛋白質(zhì)的濃度測定和純度評估。然而，在實際應用(yòng)中(zhōng)，經常會出現核酸較容易被準确測量，而蛋白質(zhì)樣品的濃度測量偏差較大的情況。很(hěn)多(duō)用(yòng)戶也困惑于此，同樣是基于紫外吸收的檢測，為(wèi)何兩種樣品的檢測性能(néng)會有(yǒu)差異呢(ne)？

    坊間也時常出現一些說法：微量隻能(néng)用(yòng)于測核酸，而蛋白測不準。如果真是這樣的話，那麽設備的使用(yòng)率就會大打折扣了。傳聞是不可(kě)輕信的，我們還是需要了解原因，然後才能(néng)找出解決方案。

    蛋白質(zhì)樣品，相較于核酸而言，更容易出現表面張力降低的情況。因此，如果你的微量分(fēn)光光度計是采用(yòng)樣品拉伸原理(lǐ)的，即形成液柱的方法，對于一些樣品而言，是難以進行測量的，這可(kě)能(néng)是造成測量準确性和重複性不好的大原因。

影響因素一：溫度和揮發

    通常來說，液體(tǐ)的溫度升高，由于分(fēn)子間引力減弱，表面張力會随之降低。這也解釋了為(wèi)何低溫保存的核酸樣品，張力較大，更易形成液柱。在夏天實驗環境較熱，或者制藥用(yòng)戶的恒溫恒濕實驗室，溫度是相對較高的，張力會随之下降。

影響因素二：鹽

    無機鹽作(zuò)為(wèi)一種非表面活性劑，具(jù)有(yǒu)水合作(zuò)用(yòng)，趨向于把水分(fēn)子拖入水中(zhōng),因此會增大表面張力，反之亦然。因此，脫鹽或低鹽的樣品，表面張力會降低，常見于蛋白純化的流程。例如在進行蛋白質(zhì)結構分(fēn)析或質(zhì)譜分(fēn)析時，樣品需經過脫鹽處理(lǐ)，這樣的樣品在進行濃度測量時，并不容易形成液柱。

    蛋白提取過程中(zhōng)經常使用(yòng)的表面活性劑（清潔劑），如SDS、Triton X100，以及在發酵過程中(zhōng)加入的消泡劑等成份，會大幅降低樣品的表面張力（想想看，連維持泡沫的張力都沒有(yǒu)了），這些物(wù)質(zhì)常會殘留在樣本中(zhōng)，難以完全去除。因此，在工(gōng)藝過程中(zhōng)測量蛋白樣品，是一項挑戰。

    當使用(yòng)移液器将微量樣品加載到點樣台後，會出現液體(tǐ)與固體(tǐ)的接觸表面，點樣台表面的親水/疏水性質(zhì)會影響液體(tǐ)的表面張力。因此，使用(yòng)拉伸法的主流品牌微量分(fēn)光光度計，點樣台表面具(jù)有(yǒu)疏水性塗層，會增大液體(tǐ)的張力。但是，随着使用(yòng)損耗，塗層會逐漸消耗，需要定期使用(yòng)試劑進行維護和再生。在正确的維護之後，這一影響因素也随之消失，但也增加了維護成本，而大多(duō)數用(yòng)戶并不知道這一點。

我們換個思維，如果一台微量分(fēn)光光度計的測量原理(lǐ)，并不依賴于液體(tǐ)的表面張力呢(ne)？Implen就可(kě)以，采用(yòng)樣品壓縮技(jì )術的Nanophotometer®檢測時無需形成液柱，而是将液滴壓縮為(wèi)很(hěn)薄的液膜。因此，無論核酸、蛋白，都可(kě)以使用(yòng)Nanophotometer®輕松測量。而封閉式的檢測環境，也很(hěn)好的保護了樣品免受揮發影響。