摘要

本文(wén)案例分(fēn)析了Thermo Scientific Varioskan LUX多(duō)功能(néng)酶标儀（以下簡稱Varioskan LUX）及其氣體(tǐ)控制模塊在細胞動力學(xué)測量中(zhōng)的應用(yòng)。通過這項技(jì )術，研究者能(néng)夠在控制CO2和O2濃度的環境中(zhōng)進行長(cháng)時間細胞培養和動力學(xué)分(fēn)析，從而提高了實驗的準确性和效率。

Varioskan LUX多(duō)功能(néng)酶标儀

Varioskan LUX是一款多(duō)功能(néng)酶标儀，能(néng)夠進行吸光度、熒光強度、化學(xué)發光、時間分(fēn)辨熒光和AlphaScreen等五功能(néng)檢測。其氣體(tǐ)控制模塊能(néng)夠同時控制CO2和O2水平，為(wèi)細胞培養提供一緻的生理(lǐ)條件。

技(jì )術背景

在藥物(wù)和學(xué)術研究中(zhōng)，基于細胞的檢測通常需要精(jīng)确控制CO2和O2的濃度。Varioskan LUX的集成氣體(tǐ)控制模塊可(kě)以在長(cháng)時間動力學(xué)研究中(zhōng)維持細胞培養的生理(lǐ)條件，确保數據的連續性和準确性。

▲Variskan LUX 多(duō)功能(néng)酶标儀中(zhōng)的氣體(tǐ)濃度

在SkanIt軟件中(zhōng)很(hěn)容易被調整和監控

 ▲Nunc Edge‑96孔闆帶有(yǒu)填充的邊緣，

可(kě)作(zuò)為(wèi)被動濕度控制

實驗方法

細胞在37℃和5% 的CO2條件下根據标準程序培養并傳代，使用(yòng)細胞培養箱（Thermo ScientificTMHeracellTM150）進行培養。每孔含1000個細胞，用(yòng)90微升培養基接種到兩個96孔闆中(zhōng)；在加入PrestoBlue試劑（10微升）前，先在培養箱中(zhōng)孵育2小(xiǎo)時。

PrestoBlue試劑是一種即用(yòng)型細胞可(kě)滲透的瑞沙脲基溶液，它利用(yòng)活細胞的還原能(néng)力作(zuò)為(wèi)細胞活力指示劑，定量測量細胞增殖。當加入到細胞時，PrestoBlue試劑被活細胞的還原環境修飾并高度熒光化。這種顔色變化可(kě)以通過熒光來檢測。

在測量室中(zhōng)保持溫度為(wèi)37℃，CO2濃度為(wèi)5%，用(yòng)Varisikan Lux儀器每小(xiǎo)時測一次熒光（激發波長(cháng)560nm，發射波長(cháng)590nm，底讀），測72小(xiǎo)時。 同時進行未控制CO2水平的實驗作(zuò)為(wèi)對照。

▲有(yǒu)或沒有(yǒu)CO2控制的情況下，在Varioskan LUX儀器中(zhōng)進行了HeLa細胞72小(xiǎo)時的動力學(xué)生長(cháng)研究。繪制了熒光值減去基線(xiàn)48個重複的平均曲線(xiàn)圖。

▲在為(wèi)期72小(xiǎo)時的測量期間，VarisKan LUX儀器中(zhōng)的二氧化碳含量保持穩定。SkanIt軟件在每個測量的運行日志(zhì)中(zhōng)記錄氣體(tǐ)濃度。

實驗結果

實驗結果表明，在Varioskan LUX儀器中(zhōng)控制CO2水平對于長(cháng)時間動力學(xué)細胞檢測至關重要。使用(yòng)PrestoBlue試劑，研究者能(néng)夠監測活細胞在72小(xiǎo)時生長(cháng)期内的增殖情況。結果顯示，在CO2控制條件下的HeLa細胞顯示出顯著的增殖，而在未控制CO2的條件下，熒光信号變化不顯著。

結論

Varioskan LUX的集成氣體(tǐ)控制模塊為(wèi)細胞動力學(xué)測量提供了多(duō)項優勢，包括節省實驗台空間、無數據間隙、通過SkanIt軟件輕松調整氣體(tǐ)濃度、同時或分(fēn)别控制CO2和O2、良好的氣體(tǐ)濃度穩定性以及運行時氣體(tǐ)濃度記錄的可(kě)追溯性。

應用(yòng)案例分(fēn)析

Varioskan LUX多(duō)功能(néng)酶标儀在細胞動力學(xué)測量中(zhōng)的應用(yòng)，展示了其在生物(wù)醫(yī)學(xué)研究中(zhōng)的高效性和實用(yòng)性。通過精(jīng)确控制細胞培養環境，研究者能(néng)夠獲得更可(kě)靠和準确的實驗數據，從而推動科(kē)學(xué)發現。